جدا نمودن ژن تنظیمی استرپتومایسین فاقد پروموتر [strr۲] از استرپتومایسز گریزئوس
Authors
abstract
سابقه و هدف: استفاده از pcr برای شناسایی و جدا نمودن ژن ها یک روش نسبتا سریع و دقیق می باشد. نکته قابل تامل در این تکنیک هدفمند طراحی نمودن پرایمرهای مورد استفاده می باشد. پرایمرها طوری طراحی می شوند که نه تنها ویژگی های ژنوم در نظر گرفته شود، بلکه کلونینگ ژن نیز منظور و یا به عبارت دیگر تسهیل گردد. آنتی بیوتیک استرپتومایسین توسط استرپتومایسز گریزئوس با به کار بردن دسته ژنی str با بیش از 25 ژن تولید می شود. این دسته ژنی دارای ژن strr است که پروتئین تنظیم کننده اختصاصی این دسته ژنی را کد می نماید. هدف از این تحقیق جدا نمودن ژن strr2 بدون پروموتر آن و سپس کلونینگ آن بود.مواد و روش ها: جهت جدا نمودن ژن strr بدون پروموتر ذاتی خود، strr2 فاقد پروموتر آغازگرهای مختلفی طراحی گردید. یک جفت از این آغازگرها (st nes)، ژن strr را در ژنوم شناسایی کرد و همچنین nested-pcr برای شناسایی ژن strr2 تکثیر شده نیز به کار رفت. در سایر آغازگرها (str np2 و str np1) جایگاه های bamhi و xbai طراحی شد، این آغازگرها نه تنها ژن strr2 را تکثیر کردند، بلکه جایگاه های برش آنزیمی در قطعات تکثیر شده را نیز ایجاد کردند.یافته ها: ژن strr2 فاقد پروموتر با استفاده از pcr تکثیر گردید و ساختار آن مورد تایید قرار گرفت. کلونینگ این ژن به طور موفقیت آمیز صورت گرفت. سپس ساختار پلاسمیدهای نوترکیب با استفاده از روش های مختلف چون الکتروفورز،pcr وهضم آنزیمی مورد تایید قرار گرفت.استنتاج: با استفاده از این وکتور می توان ژن strr2 فاقد پروموتر را در وکتورهای ویژه استرپتومایسز که واجد پروموترهای القایی هستند ساب کلون نمود.
similar resources
جدا نمودن ژن تنظیمی استرپتومایسین فاقد پروموتر [StrR2] از استرپتومایسز گریزئوس
Background and purpose: Polymerase chain reaction (PÇR) is a rather quick and accurate method employed for gene detection and isolation. Primer designing is an important issue in this technique and plays a critical role in considering both the genome properties and cloning of the isolated genes. Streptomycin antibiotic is produced by Streptomyces griseus using str gene cluster with more than 25...
full textساخت ناقل های نوترکیب حاوی ژن کدکننده پروتئین تنظیمی تولید آنتی بیوتیک استرپتومایسین، جدا شده از یک سویه استرپتومایسس گریزئوس ایرانی
strr یک تنظیم کننده کلیدی در رونویسی خوشه ژنی بیوسنتز آنتی بیوتیک استرپتومایسین است. این پروتئین توسط ژن strr استرپتومایسس گریزئوس با طول 1053 جفت باز کد می شود. هدف این تحقیق، کلونینگ ژن strr از سویه استرپتومایسس گریزئوس ایرانی ptcc1127 و همچنین atcc1952 درناقل pma::hyg بود. برای این منظور پرایمرهای اختصاصی ژن strr با نرم افزار oligo طراحی شدند، قطعه با طول 1134جفت باز به روش pcr تکثیر شد. سپس...
full textتشخیص و کلون نمودن پروموتر ژن pep موشی
چکیده پروتئین پراکسیزوی (pep)، یکی از پروتئین های ماتریکس پراکسیزومی است که بوسیله ژن fndc5 کد می شود، که در موش شامل 6 اگزون است و روی کروموزوم 4 قرار دارد. cdna آن توسط ferrer martinez و همکارانش کلون شد. این پروتئین همولوژی ای با دیگر پروتئین ها ندارد، هرچند در زیرواحدهای اسید آمینه های114 -31 حاوی یک دامنه فیبرونکتین تایپ iii می باشد. هنوز هیچ نقش خاصِ برای این پروتئین شناخته نشده است. مشخص...
15 صفحه اولهمسانهسازی و بررسی پروموتر دائمی یک ژن پلی‌یوبی‌کوئیتین از گیاه نخود
ایجاد گیاهان تراریخته نیازمند پروموترهای جدید است. با ظهور فناوری‌های توالی‌یابی نسل نو و تولید انبوه داده‌های ژنومی برای گونه‌های مختلف گیاهان زراعی که با توسعه ابزارهای بیوانفورماتیکی همراه شده، فرصت مناسبی برای شناسایی، جداسازی و بررسی ویژگی‌های پروموترهای جدید فراهم آمده است. به‌دلیل وجود ملاحظاتی در مورد استفاده از پروموترهای ویروسی در گیاهان تراریخته لزوم همسانه‌سازی و استفاده از پروموتر...
full textساخت ناقل بیانی pGCGi حاوی ژن GUS اینترون‌دار و تأیید آن با روش‌های ریزپرتابی و تزریق اگروباکتریوم
بیان موقت یک روش سریع و آسان در آنالیز بیان پروموتر است. این روش تحت تأثیر موقعیت ورود تراژن در ژنوم واقع نمی‌شود، زیرا این نکته می‌تواند بیان تراژن را در روش انتقال دایمی تحت تأثیر قرار دهد. بیان موقت از راه‌های مختلف نظیر: اگرواینفیلتراسیون، ریزپرتابی و وکتورهای ویروسی قابل انجام است. بیان موقت مبتنی بر اگروباکتریوم کارآیی بالا و قابل قبول در آنالیز بیان تراژن، خاموشی ژن، برهمکنش پاتوژن-میزبا...
full textMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندرانجلد ۲۱، شماره ۸۴، صفحات ۲۳-۳۱
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023